提纯鹅肥肝中卵磷脂的方法比较
一、酶催化精制法:
酶法催化可以通过酶的作用降解脂蛋白或胞壁、脂多糖等脂类复合体,从而促使鹅肥肝油脂的释放,粗磷脂中的磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇和磷脂酸等磷脂,利用磷脂酶的作用将其转化成PC,这样可大大增加PC的含量,增加其纯度12此外,可以通过蛋白酶将提取鹅肝中的脂蛋白酶解,释放出磷脂,再通过有机溶剂将磷脂提取出来,从而增加了磷脂的提取率,达到磷脂越有益的利用。
二、乙酰化技术:
从鹅肥肝中得到的磷脂主要是卵磷脂和脑磷脂。为得到越纯的卵磷脂产品,需要将粗卵磷脂中的脑磷脂除掉。乙酰化技术的原理是利用脑磷脂能与乙酸乙酯等发生酰化反应,而卵磷脂不能发生酰化反应的性质来提纯卵磷脂的,其缺点是产品杂质含量较多。
三、卵磷脂的检测分析方法:
常见的磷脂检测方法有:磷钼蓝比色法、重量法、薄层层析法(TLC)、液相色谱法(HPLC)、核磁共振法(NIMR)、红外光谱法等。其中重量法和比色法适合于磷的总量的测定,而不适合不同磷脂组分含量的测定。在对高含量磷脂进行检测时,一般采用TLC法初步定性,再经过HPLC进行定量检测,也可采用薄层扫描仪扫描薄板进行定量检测,这种方法没有效高液相色谱法的准确度高。
四、薄层层析法(TLC):
LC法价格低廉,简便易于操作,应用越为广泛,为我国很多研究机构所选用,此方法的原理是:在硅胶板上点样后,鹅肥肝中的磷脂被硅胶吸附,将硅胶板放入层析缸中,在展开剂中展开,根据不同磷脂组分的极性和溶解性不同,硅胶对不同磷脂组分的吸附能力强弱也不尽相同,吸附能力强的在硅胶板上移动的距离较短,吸附能力弱的在硅胶板上移动的距离较长,和标准鹅肝样品进行比较,比较样品在硅胶板上跑的斑点的比移值(Rr)对磷脂进行定性。各磷脂的定量检测可采用薄层定量扫描仪计算积分值倒,但是这种方法的,重复性较差,干扰因素比较多,须对实验条件进行严格控制。
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